rapd縮寫是什么意思,rapd的全稱及含義,rapd全稱意思大全
rapd縮寫是什么意思
RAPD英文含義
1、RAPD的英文全稱:relative afferent pupillary defect (ophthalmology; aka Marcus-Gunn Pupil) | 中文意思:───相對(duì)傳入瞳孔缺陷(眼科;又名馬庫斯·岡恩瞳孔)
2、RAPD的英文全稱:Randomly Amplified Polymorphic DNA | 中文意思:───隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA
3、RAPD的英文全稱:Randomly Amplified Polymorphism DNA | 中文意思:───隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA
4、RAPD的英文全稱:relative afferent pupillary defect (ophthalmology; aka Marcus-Gunn Pupil) | 中文意思:───相對(duì)傳入瞳孔缺陷(眼科;也就是上瞼下垂合并的學(xué)生)
5、RAPD的英文全稱:Rapid Application Protocol Driver | 中文意思:───快速應(yīng)用程序協(xié)議驅(qū)動(dòng)程序
6、RAPD的英文全稱:Resource For Algorithm For Preprocessing The Database | 中文意思:───數(shù)據(jù)庫預(yù)處理算法資源
7、RAPD的英文全稱:Relative Afferent Pupillary Defect | 中文意思:───相對(duì)傳入瞳孔缺陷
8、RAPD的英文全稱:Random amplified polymorphic DNA | 中文意思:───隨機(jī)擴(kuò)增的多態(tài)性DNA
9、RAPD的英文全稱:Randomly Amplified Polymorphic DNA (aka Random Amplification of Polymorphic DNA) | 中文意思:───隨機(jī)擴(kuò)增DNA多態(tài)性(即隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA)
標(biāo)記和性狀共分離什么意思
標(biāo)記和性狀共分離:在有性繁殖的后代,假如基因附近有一緊密連鎖的分子標(biāo)記,在細(xì)胞減數(shù)分裂時(shí)分子標(biāo)記與基因之間由于相距太近很少有機(jī)會(huì)發(fā)生交換。
標(biāo)記和性狀共分離如果目的片段存在一個(gè)突變,則所有大于某一大小對(duì)應(yīng)于突主變位置的雙脫氧終止片段無野生型系統(tǒng),對(duì)于每一個(gè)突有多次機(jī)會(huì)檢測(cè)其遷移率改變,提高了檢測(cè)突變的效率。
ddF方法克服了SSCP分析時(shí)因DNA長(zhǎng)度影響SSCP顯示的困難,通過一種雙脫氧核昔酸生產(chǎn)特異性的單鏈DNA,使其中長(zhǎng)度合適的DNA片段顯示SSCP改變。
標(biāo)記和性狀共分離隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA:
它是利用隨機(jī)引物(一般為8—10bp)通過PCR反應(yīng)非定點(diǎn)擴(kuò)增DNA片段,然后用凝膠電泳分析擴(kuò)增產(chǎn)物DNA片段的多態(tài)性。擴(kuò)增片段多態(tài)性便反映了基因組相應(yīng)區(qū)域的DNA多態(tài)性。RAPD所使用的引物各不相同。
但對(duì)任一特定引物,它在基因組DNA序列上有其特定的結(jié)合位點(diǎn),一旦基因組在這些區(qū)域發(fā)生DNA片段**人、缺失或堿基突變,就可能導(dǎo)致這些特定結(jié)合位點(diǎn)的分布發(fā)生變化,從而導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物數(shù)量和大小發(fā)生改變,表現(xiàn)出多態(tài)性。
就單一引物而言,其只能檢測(cè)基因組特定區(qū)域DNA多態(tài)性,但利用一系列引物則可使檢測(cè)區(qū)域擴(kuò)大到整個(gè)基因組,因此,RAPD可用于對(duì)整個(gè)基因組DNA進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè),也可用于構(gòu)建基因組指紋圖譜。
請(qǐng)問,雙假測(cè)交理論是什么能說詳細(xì)點(diǎn)最好。
分子標(biāo)記指可遺傳并可檢測(cè)到的DNA序列或蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)標(biāo)記主要是指同工酶、等位酶、貯藏蛋白等等,本文主要介紹DNA標(biāo)記。理想的分子標(biāo)記應(yīng)具有以下幾個(gè)條件:①以孟德爾方式遺傳。②多態(tài)性好,自然條件下存在許多變異位點(diǎn)。③遍布整個(gè)基因組,能夠檢測(cè)到整個(gè)基因組的變異。④共顯性遺傳,即可以區(qū)別純合體和雜合體。⑤表現(xiàn)“中性”,即不影響目標(biāo)性狀的表達(dá)。⑥重復(fù)性好,便于資源共享。⑦自動(dòng)化程度高。近年來,關(guān)于分子標(biāo)記的研究進(jìn)展很快,本文僅就分子標(biāo)記在果樹研究中的應(yīng)用及存在問題做一介紹,并對(duì)應(yīng)用前景做一展望。
一、分子標(biāo)記在果樹研究中的應(yīng)用:
1.分子標(biāo)記在種質(zhì)資源研究中的應(yīng)用。
(1)系譜分析和分類。物種在進(jìn)化過程中,其DNA是一個(gè)漸變的過程。遺傳關(guān)系越近,基因組DNA的差異越小,反之,差異越大。HARADA T等用RAPD標(biāo)記對(duì)兩個(gè)三倍體蘋果品種“喬納金”和“陸奧”進(jìn)行了分析,結(jié)果表明,作為母本的金冠提供了減數(shù)的二倍體配子。沈向等對(duì)杏進(jìn)行了RAPD分析,將41個(gè)品種分為5類。
(2)種質(zhì)保存和核心種質(zhì)的建立。如何事理有效地管理和利用種質(zhì)資源,當(dāng)今世界出現(xiàn)了兩種趨勢(shì),其中之一就是建立核心種質(zhì)。目的是以最少的種質(zhì)樣品重復(fù)而最大地包含一個(gè)種及其野生種的遺傳多樣性。分子標(biāo)記為人們提供了一個(gè)有效、快速的途徑。目前已建立的核心種質(zhì)涉及到谷物、豆類、牧草、蔬菜和果樹等。AMY K SZEWC-MCFADDEN等用SSR結(jié)合園藝性狀建立了蘋果的核心種質(zhì),HOKANSON等也建立了蘋果核心種質(zhì)。
(3)構(gòu)建指紋圖譜和品種鑒別。高質(zhì)量的指紋圖譜可作為新品種登記、注冊(cè)和產(chǎn)權(quán)保護(hù)的重要依據(jù)。特別是對(duì)于無性繁殖的果樹來說,同物異名、同名異物現(xiàn)象很嚴(yán)重,利用分子標(biāo)忘本中高效、準(zhǔn)確地建立指紋圖譜、鑒別果樹品種。張潞生利用AFLPs建立了清晰的狒猴桃的指紋圖譜,宋婉建立了棗優(yōu)良品種的DNA指紋圖譜。祝軍對(duì)蘋果進(jìn)行了AFLP分析,得到了蘋果的DNA指紋圖譜,劉孟軍對(duì)棗和酸棗進(jìn)行了FRAPD分析,將親緣關(guān)系極近的金絲小棗和無核小棗區(qū)分開。
(4)體細(xì)胞雜種和外源基因滲入的鑒定。利用分子標(biāo)記可在試管苗期快速、準(zhǔn)確地對(duì)體細(xì)胞雜種進(jìn)行鑒定。史永忠對(duì)柑橘進(jìn)行了體細(xì)胞雜種鑒定,認(rèn)為體細(xì)胞雜種表現(xiàn)為雙親譜帶之和。另外,珠心胚現(xiàn)象使柑橘合子苗與珠心苗在苗期很難鑒別,嚴(yán)重陰礙柑橘的雜交育種,LURO對(duì)檸檬的實(shí)生后代RAPD分析指出,雜交合子苗由于有外源基因的滲入,譜帶比珠心苗多。
2.構(gòu)建分子遺傳圖譜。
在人類基因組計(jì)劃的推動(dòng)下,新西蘭和歐洲的兩個(gè)“蘋果基因組”計(jì)劃已經(jīng)啟動(dòng),同時(shí)美國、歐洲也啟動(dòng)了李屬植物的基因組作圖工程。目前已經(jīng)建立或初步建立了基因組圖譜(險(xiǎn)人類基因組圖譜為物理圖譜外,最近中科院基因研究中心構(gòu)建了高分辨率的水稻基因組物理圖譜,其它絕大多數(shù)為遺傳連鎖圖譜)的果樹有蘋果、桃、櫻桃、扁桃、核桃、草莓、葡萄、柑橘、香蕉等十幾種。
建立遺傳連鎖圖譜,首先要有一個(gè)作圖群體。作圖的群體主要有F2、F3、BC等。除此之外,單倍體也可應(yīng)用于果樹基因組作圖?!皢文?biāo)本”策略最初來源于對(duì)人的精子的研究,后來用于對(duì)針葉松(用大配子群體)和斑馬魚的胚胎研究上。STOCKINGER等以孢子來源的愈傷培養(yǎng)群體為試材,做了甜櫻桃的遺傳連鎖圖譜。他認(rèn)為,以單倍體為試材,大多數(shù)隨機(jī)引物擴(kuò)增中不能標(biāo)記的雜和位點(diǎn)不會(huì)發(fā)生,可以促進(jìn)連鎖圖譜的建立。陳洪、李平等利用雙單倍體(DH)進(jìn)行水稻基因組作圖,指出:F2代或BC1群體,不能通過種子傳代維持,所以難以進(jìn)一步發(fā)展已建成的圖譜,而DH株系為一個(gè)永久性的作圖群體,而且RAPD特別適于DH群體作圖。
HEMMAT M等針對(duì)蘋果和其他異型雜交的物種,因無性繁殖而且種內(nèi)雜交受抑以至于很難有可利用的自交或回交群體用于作圖這一事實(shí),提出了“雙假測(cè)交”(Double pseudotestcross)的構(gòu)想?!半p假測(cè)交”設(shè)想最初應(yīng)用于同工酶上,HEMMAT將之?dāng)U展至RFLP和RAPD技術(shù),利用蘋果“Rome Beauty”與“White Angel”雜交,獲得F1代,為父、母本分別作圖,獲得兩張遺傳連鎖圖譜。PATRICK J C等利用“雙假測(cè)交”的構(gòu)想做了三張連鎖圖譜,其中“Wijcik Mclntosh”的圖譜包括238標(biāo)記,分布于19個(gè)連鎖群,覆蓋基因組1206 cM;“NY75441—67”的圖譜有110個(gè)標(biāo)記,分布于16個(gè)連鎖群,“NY 75441—58”的圖譜有183個(gè)標(biāo)記,分布于18個(gè)連鎖群。主要為RAPD標(biāo)記,另外還有6個(gè)同工酶標(biāo)記,4個(gè)形態(tài)學(xué)標(biāo)記(Rf:果皮顏色;Vf:黑星??;Co:柱狀生長(zhǎng)習(xí)性;Ma:蘋果酸),標(biāo)記之間的平均距離為5.0cM。
作圖群體確定后,采用分子標(biāo)記對(duì)作圖群體進(jìn)行分析。對(duì)于獲得的標(biāo)記進(jìn)行“適合性測(cè)驗(yàn)”,不符合孟德爾遺傳的標(biāo)記不能用于作圖。劉孟軍以蘋果為試材研究了種間雜交一代的分離方式,結(jié)果表明有8.0%的標(biāo)記偏離孟德爾分離比例,1.5%的標(biāo)記屬異常分離(雙親有而后代沒有的標(biāo)記或隔代遺傳的標(biāo)記)。類似的結(jié)果在桃、核桃上也有報(bào)道,這種分離異常的原因可能與受粉、受精異常有關(guān),另一解釋是群體太小或取樣有誤差。所以作圖群體一般為50~200個(gè)。
“雙假測(cè)交”構(gòu)想中,對(duì)于父本表現(xiàn)為雜合而對(duì)母本表現(xiàn)為純合隱性的標(biāo)記用于父本作圖,對(duì)于母本表現(xiàn)為雜合而對(duì)父本表現(xiàn)為純合隱性的標(biāo)記用于母本作圖。對(duì)于父、母本均表現(xiàn)為雜合的標(biāo)記可用以確定雙親連鎖圖中的同源連鎖群。對(duì)于以共顯性RFLP和等位酶為作圖手段時(shí),符合1∶2∶1和1∶1分離比例的標(biāo)記用于作圖以RAPD為作圖手段時(shí),符合3∶1和1∶1分離比例的標(biāo)記用于作圖。用RAPD技術(shù)以單倍體群體為作圖群體時(shí),符合1∶1或1∶2或2∶1的分離比例,標(biāo)記用于作圖。因?yàn)檩^高比值的標(biāo)記可能是由于分離異?;蚍沁B鎖片段的共遷移而形成的,所以不作為可遺傳的標(biāo)記,對(duì)于只在一親本中為雜合而在另一親本為純合的位點(diǎn),其F1代按1∶1分離,此時(shí)RAPD能提供與共顯性標(biāo)記RFLP一樣的信息量。采用的標(biāo)記種類對(duì)作圖有一定影響,POWELL等提出了MI(Marker index)值的概念,指每個(gè)反應(yīng)的多態(tài)性產(chǎn)物的數(shù)量。即MI值越大,多態(tài)性越好。就MI值而言,幾種分子標(biāo)記按MI值由大到小依次為AFLPs、SSRs、RAPDs、RFLPs。故此可利用幾種分子標(biāo)記結(jié)合起來用于建立高密度的連鎖圖譜。
3.基因連鎖標(biāo)記的尋找與基因**。
基因**是獲得有利基因的重要條件,對(duì)于大多數(shù)果樹來說,目前還不能進(jìn)行準(zhǔn)確的基因**,所以當(dāng)務(wù)之急是尋找與基因連鎖緊密的分子標(biāo)記。標(biāo)記目標(biāo)性狀基因,可以用的群體主要有兩種:一是利用近等基因系(NIL,near-isogenic line),二是利用分離群體分組分析(BSA,Bulk segregant analysis)。近等基因系是指只有目標(biāo)性狀基因有差異,其它性狀基因相同的兩個(gè)群體。近等基因系是通過不平衡雜交獲得的。所以在果樹上是很難獲得的。目前果樹上主要是利用BSA法,BSA法的具體做法是:將分離群體中研究的目標(biāo)性狀根據(jù)其類型(如抗病、感病)分成兩組,將每組內(nèi)一定數(shù)量的植株DNA等量混合,形成兩個(gè)池,這兩個(gè)池除在目標(biāo)性狀(抗病性)上有差異外,其余遺傳背景均相同。利用分子標(biāo)記技術(shù)尋找兩個(gè)池的擴(kuò)增譜帶的差異,這種多態(tài)性極可能與目標(biāo)基因連鎖。再用所有的分離后代單株,驗(yàn)證該多態(tài)性是否真正與目標(biāo)基因連鎖及連鎖距離的確定。如果分離群體不易獲得,可采取混合樣品法。以抗病性為例,即盡可能地把所有的抗病品種的DNA等量混合,作為一個(gè)基因池;把所有的感病品種的DNA等量混合,作為一個(gè)基因池,對(duì)兩個(gè)基因池的DNA多態(tài)性進(jìn)行分析,但是這種方法不能進(jìn)行遺傳距離的計(jì)算,彭建營利用混合樣品法找出了一個(gè)可能與棗無核性狀相關(guān)的DNA片段。另外,果樹上很多性狀為數(shù)量性狀,對(duì)于控制數(shù)量性狀的QTLs(Quan-titative trait loci)的尋找,分子標(biāo)記提供了非常方便快捷的方法。NANDIS等人利用AFLP和選擇基因型(Se-lective genotyping),為控制水稻抗?jié)车腝TLs**。并指出選擇基因型對(duì)于QTLs的**提供了一條快速容易的途徑。選擇基因型指在RIL群體中,選擇目標(biāo)性狀是兩極(如特抗?jié)?、?duì)澇極敏感)的個(gè)體來進(jìn)行DNA多態(tài)性分析。除了選擇基因型外,間隔作圖(Interval mapping),后代測(cè)定和同時(shí)搜尋(Progeny testing and simul-taneous search),均有利于提高QTLs作圖的準(zhǔn)確度和效率。另外,還可以利用已有的連鎖圖進(jìn)行標(biāo)記,一旦發(fā)現(xiàn)某一目標(biāo)基因被**在某一染色體上,就可以選擇分散在染色體不同位點(diǎn)上的標(biāo)記,進(jìn)行染色體滑步(Chromosomewalking),直至找到目標(biāo)基因。
日前,已在各種果樹上找到了與主要性狀基因連鎖的標(biāo)記。
4.MAS(Marker-assisted selection)。MAS是分子標(biāo)記在育種上的一個(gè)重要應(yīng)用。當(dāng)與目標(biāo)基因相連鎖的分子標(biāo)記和 目標(biāo)基因相距5cM之內(nèi)時(shí),即可用于MAS。目前果樹上可用做MAS的標(biāo)記不是很多。MAS可以跟蹤、檢測(cè)外源基因、進(jìn)行全基因組選擇,輔助選擇同效基因的累加,尤其是在抗病性選擇上,MAS提供了一個(gè)準(zhǔn)確、快速的方法。利用與抗病基因緊密連鎖的分子標(biāo)記,可在無病侵染條件下,進(jìn)行早期抗病性鑒定,無須后代測(cè)定即可進(jìn)行重疊抗性基因的組建。有關(guān)MAS的效率有人作過研究,指出:用與互斥相(Kepulsion-phase)連鎖的標(biāo)記可提高M(jìn)AS的效率。另外以純合互斥相和互引相的RAPD標(biāo)記的表現(xiàn)型為基礎(chǔ)的個(gè)體選擇與以共顯性的標(biāo)記(RFLPs)為基礎(chǔ)的選擇、僅用互斥相標(biāo)記的選擇是相似的。再有,當(dāng)用于重組近交系上時(shí),以連鎖的RAPD標(biāo)記為基礎(chǔ)的MAS與以RFLP標(biāo)記為基礎(chǔ)的MAS的效率相似,因?yàn)橹亟M近交系的雜合水平最小。
雖然MAS在理論上對(duì)植物改良有益,但在實(shí)踐上還未見成功報(bào)道。限制應(yīng)用的因素主要有以下幾個(gè)方面:①連鎖群中探測(cè)到的與目標(biāo)性狀緊密連鎖的分子標(biāo)記位點(diǎn)的數(shù)目;②探測(cè)低遺傳率的數(shù)量性狀所需群體的大小;③由確定多個(gè)分子標(biāo)記位點(diǎn)的權(quán)重而帶來的取樣誤差;④表型信息和獲得每單位信息量的費(fèi)用。
5.雜種優(yōu)勢(shì)預(yù)測(cè)。
雜種優(yōu)勢(shì)來源于親本有利基因的雜合性。由于在某種程度上,兩親本品系具有與雜種優(yōu)勢(shì)有關(guān)的DNA區(qū)域純合度較高,其F1代雜種優(yōu)勢(shì)就可能越大。所以可以根據(jù)各品系在這些可能與雜種優(yōu)勢(shì)有關(guān)的DNA區(qū)域上的多態(tài)性,構(gòu)建雜種優(yōu)勢(shì)群,指導(dǎo)雜交組合的選配和雜種優(yōu)勢(shì)的分析和預(yù)測(cè)。ZHANG等用RFLP和SSR標(biāo)記對(duì)水稻的雜種優(yōu)勢(shì)作了雙列分析,在果樹上尚未見有這方面的報(bào)道。除以上用途外,分子標(biāo)記還可用于基因的克隆,即根據(jù)重要農(nóng)藝性狀的標(biāo)記及基因組圖譜,采用染色體滑步法(Chromosome walking)等手段克隆基因。目前,果樹上已克隆的基因至少有蘋果、獼猴桃的ACC氧化酶基因,藍(lán)莓的抗旱抗低溫蛋白基因,葡萄的控制果實(shí)顏色的基因。蘋果抗性基因的克隆研究較多,一旦抗性基因被克隆,這些基因就可能轉(zhuǎn)到其他的品質(zhì)優(yōu)良但抗性差的品種中去,這對(duì)蘋果的抗性育種無疑將是一次革命。
二、存在問題及前景展望:
果樹研究的一個(gè)主要目標(biāo)就是培育優(yōu)質(zhì)抗病的優(yōu)良品種,對(duì)于多年生果樹來說,由于其高度雜合、自交不親和、育種周期長(zhǎng)等特點(diǎn),傳統(tǒng)的育種方法盲目性很大。獲得控制主要經(jīng)濟(jì)性狀的基因,進(jìn)而能調(diào)控這些基因的表達(dá),成為幾代果樹育種工作者的夢(mèng)想。而分子標(biāo)記的應(yīng)用給果樹育種注入了新的活力。在蘋果基因組計(jì)劃和李屬植物基因組計(jì)劃的有力推動(dòng)下,一系列的分子連鎖圖譜已經(jīng)建成。高密度的分子連鎖圖譜對(duì)于基因**、基因克隆及MAS意義重大。然而同其它農(nóng)作物相比,果樹的遺傳連鎖圖譜飽和度及可用于MAS的標(biāo)記數(shù)目還有待于增加。
以基因組作圖為中心的基因組學(xué)發(fā)展很快。近幾年又出現(xiàn)了一門新的學(xué)科——比較基因組學(xué)(Compar-ative mapping)。經(jīng)研究證明:禾谷類物種之間基因組較保守,染色體上的基因順序和含量有一定相似性,比較基因組學(xué)正是基于這樣一種事實(shí)而發(fā)展起來的。比較基因組學(xué)為進(jìn)化研究、飽和遺傳圖譜的建立、直向同源基因(Orthologus genes)基于圖譜的克隆提供了有力手段,一旦某同源基因被克隆和測(cè)序,信息可很快用于其它植物上同源基因的克隆。隨著不同實(shí)驗(yàn)室李屬植物遺傳連鎖圖譜的初步建立,作圖的下一步要涉及到各圖譜的比較和統(tǒng)一,目的在于產(chǎn)生該物種的較為完整的圖譜。目前以桃的基因組克隆做探針在歐洲酸櫻桃上研究表明:50%的桃的基因組克隆導(dǎo)致了歐洲酸櫻桃RFLPs的產(chǎn)生,另外,桃第三個(gè)連鎖群上緊密連鎖的兩個(gè)RFLP標(biāo)記B4A9和B7A5在歐洲酸櫻桃上也緊密連鎖。以上研究結(jié)果無疑對(duì)李屬乃至整個(gè)果樹比較基因組的研究提供了良好的開端。
隨著分子標(biāo)記手段的不斷更新和基因組圖譜的日趨飽和,其應(yīng)用也隨之向深度和廣度推進(jìn),分子生物學(xué)又出現(xiàn)了“功能基因組學(xué)”(Function genomics)和后基因組學(xué)(Post genomics),主要是研究基因結(jié)構(gòu)、表達(dá)和調(diào)控。隨之而產(chǎn)生的DNA芯片技術(shù)(DNA chip)和信使RNA差異顯示技術(shù)(Messenger RNA differentialdisplay,mRNA DD)為基因的**、表達(dá)研究提供了嶄新工具,相信在人類基因組計(jì)劃的強(qiáng)大推動(dòng)下,在水稻、小麥等農(nóng)作物基因組研究的影響下,分子標(biāo)記在果樹的應(yīng)用研究必將迎來一個(gè)迅速發(fā)展的時(shí)代。
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